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EMSA 凝膠阻滯遷移電泳檢測

服務簡介

凝膠遷移或電泳遷移率實驗(electrophoretic mobility shift assay,EMSA)是一種研究DNA/RNA結合蛋白和其相關的DNA/RNA結合序列相互作用的技術,可用于定性和定量分析。基于DNA-蛋白質或RNA-蛋白質復合體在聚丙烯酰胺凝膠電泳(PAGE)中有不同遷移率的原理,當轉錄因子與特異的DNA或RNA結合后,其在PAGE中的遷移率將小于未結合核蛋白轉錄因子的DNA,從而檢測到活化的與DNA或RNA結合的蛋白轉錄或調節因子。

主要流程

標準蛋白樣品制備與定量 探針設計合成 蛋白與探針等進行反應 SDS-PAGE電泳 紫外膠聯 雜交孵育 圖片掃描

訂購信息

服務項目

說明

周期

報價

生物素標記探針設計與制備

客戶提供結合基因序列或參考文獻來分析設計合成,生物素標記法為經典EMSA方法

1~2周

詳細

熒光標記探針

利用近紅外熒光標記探與蛋白結合在凝膠板上通過近紅外掃描儀直接測定電泳位置

1~2周

蛋白標準樣品的制備與濃度精確測定

蛋白樣品制備要現配現用,

1~2周

EMSA 凝膠電泳遷移檢測

1個探針和1個蛋白做一個EMSA反應(5條泳道,包括1條free probe泳道,3條蛋白梯度泳道;1條特異性競爭泳道)

3~5工作日

結合蛋白的純化與質譜檢測(未知蛋白需要檢測)

條帶切膠蛋白純化,質譜檢測進行肽段檢索與聚類分析

1周

客戶提供

提供樣品
1) 細胞(>2 × 107);
2) 目的蛋白一抗及相關試劑盒;
3) 預測核酸作用基因序列;
4) 陽性對照樣品(盡量提供)
5) 有相關文獻請提供。
交付結果
1) 探針設計合成信息;
2) 原始數據、結果圖片;
3) 完整的實驗報告(含實驗步驟、流程及試劑耗材廠家)
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